流行病等細菌感染相關(guān)疾病是對公共衛(wèi)生的主要威脅，已成為全球的十大死亡原因之一。因此，迫切需要新的、高效的策略來對抗細菌感染，并有大量的努力致力于開發(fā)替代抗菌劑。抗菌劑的殺菌效果如何，需要通過一系列體外抗菌實驗來驗證。
作為第三方檢測中心，中科檢測機構(gòu)擁有CMA認證檢測資質(zhì)，檢測設備齊全，數(shù)據(jù)科學可靠，可出具國家認可的體外抗菌性能評價報告。
體外抗菌性能評價方法：孔徑抑菌法
孔徑抑菌法是一種簡單常用的體外抗菌測定方法。其原理是將待測物質(zhì)溶解于培養(yǎng)基中，然后在瓊脂平板上制作不同直徑的孔洞，將待測物質(zhì)溶液滴入孔洞中，觀察細菌在孔洞周圍的生長情況。如果待測物質(zhì)具有抑菌作用，則孔洞周圍會出現(xiàn)無菌區(qū)域。
操作步驟：
1.準備瓊脂平板和待測物質(zhì)溶液。
2.在瓊脂平板上制作不同直徑的孔洞。
3.將待測物質(zhì)溶液滴入孔洞中。
4.培養(yǎng)—定時間后，觀察孔洞周圍的生長情況。
體外抗菌性能評價方法：最小抑菌濃度法
最小抑菌濃度法是一種定量評估待測物質(zhì)對細菌生長的抑制能力的方法。其原理是在一系列濃度梯度的待測物質(zhì)溶液中接種細菌，通過觀察最低有效濃度來評估其抗菌活性。
操作步驟：
1.準備—系列待測物質(zhì)溶液，濃度遞增。
2.在試管中加入一定濃度的待測物質(zhì)溶液和細菌懸液。
3.培養(yǎng)—定時間后，觀察細菌生長情況。
4.根據(jù)最低有效濃度判斷待測物質(zhì)的抗菌活性。
體外抗菌性能評價方法：平板計數(shù)法
抗菌劑對細菌進行殺菌處理以后，將細菌稀釋到合適的倍數(shù)進行平板涂布并對長出的菌落進行計數(shù)。通過計算細菌存活率或者致死率來表征抗菌劑抗菌效果。
體外抗菌性能評價方法：活死染色法
對細菌進行活死染色也是一種常用的表征抗菌效果的方法?？咕鷦毦M行處理后，再對細菌進行活死染色。
目前有許多品牌的細菌活死染色試劑盒，以SYTO-9和PI為例，SYTO-9是一種能夠透過細胞膜的綠色熒光核酸染料，可用于活的和死的真核細胞的RNA和DNA染色，以及革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌。
PI是一種可對DNA染色的細胞核染色劑，在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。PI不能穿透完整細胞膜，但對凋亡晚期細胞和死細胞的破損細胞膜能夠穿透，并使細胞核紅染。
體外抗菌性能評價方法：清除生物膜法
近年來，隨著醫(yī)學界對某些環(huán)境中常見細菌所致的一些慢性和頑固性疾病的深入了解，發(fā)現(xiàn)生物膜（生物被膜）是導致這些細菌性疾病難以根治的主要原因。
以生物膜形式存在的細菌對抗生素等殺菌劑、惡劣環(huán)境及宿主免疫防御機制有很強的抗性，因此評價抗菌劑對生物膜的抑制效果也是評價抗菌劑殺菌效果的標準之一。
通過結(jié)晶紫染色觀察生物膜剩余面積或者測其OD值可以表征抗菌劑對生物膜的抑制效果。另外也可以用過熒光共聚焦成像來表征對生物膜的抑制效果。
